蜀科高速冷凍離心機在基因提取中的應用

  乙醇被*為是一種可以替代汽油的液體燃料，也是很好的燃油品質(zhì)改善劑，甘蔗可以生成乙醇燃料。為提高甘蔗發(fā)酵效率，可提取釀酒酵母a288c基因組，克隆INO1基因，在工業(yè)釀酒酵母中過(guò)表達，提高菌種耐乙醇能力，提高細胞活力。下面簡(jiǎn)單介紹下提取和擴增過(guò)程。

釀酒酵母基因組提取

  原始釀酒酵母菌株s288c活化后，使用YPD固體培養基進(jìn)行平皿劃線(xiàn)分離得到釀酒酵母菌株s288c單菌落，牙簽挑取單菌落接50ml YPD液體培養基進(jìn)行30 ℃搖瓶培養24-30 h，用蜀科高速冷凍離心機去上清（采用高速冷凍離心機保護樣本生物活性）；按照釀酒酵母基因組DNA提取試劑盒提取基因組DNA。

INO1基因序列擴增

  以釀酒酵母S288C基因組DNA為模板進(jìn)行PCR擴增。反應條件如下：預變性94℃ 5 min，變性94℃30s，退火54℃ 30s,延伸72℃ 97s，30個(gè)循環(huán)，延長(cháng)72℃。10min保存4℃。反應結束后取2 uL PCR擴增產(chǎn)物于1％瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測。采用膠回收試劑盒進(jìn)行膠回收。

  回收后的PC產(chǎn)物進(jìn)行連接、轉化和菌液PCR檢測，后進(jìn)行質(zhì)粒提取和測序。

  蜀科離心機在生物工程領(lǐng)域有著(zhù)非常廣泛的應用，合作過(guò)的相關(guān)企業(yè)近百家，歡迎各位有興趣的客戶(hù)來(lái)電或者在線(xiàn)咨詢(xún)交流。